BMP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402432

Visão geral

BMP1 codifica a proteína morfogenética óssea 1 (BMP-1), uma metaloprotease secretada que atua como uma procollagénio C-proteinase e como uma enzima-chave na maturação da matriz extracelular (MEC). A BMP-1 cliva precursores estruturais, incluindo procollagénios e outras proteínas associadas à MEC, coordenando a fibrilogénese do colagénio, a remodelação tecidular e a sinalização celular dependente da matriz. Pelas suas funções na montagem e renovação da MEC, a atividade da BMP-1 cruza-se com vias que regulam a adesão celular, a migração e a mecanotransdução nos tecidos conjuntivos. A desregulação da função de BMP1 tem sido associada a doenças hereditárias e adquiridas que envolvem processamento anómalo do colagénio e integridade do osso/tecido conjuntivo, tornando-a relevante para estudos de biologia da matriz e desenvolvimento esquelético.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BMP-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BMP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BMP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BMP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BMP-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BMP1 para a investigação da sinalização de BMP-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BMP1 críticos para a função BMP-1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BMP1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo BMP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo BMP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BMP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo BMP-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR BMP-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BMP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BMP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.