Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Blr1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402672-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Blr1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Blr1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Blr1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CXCR5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Blr1 Anticorpo (C-3): sc-373775
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Blr1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402672-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Blr1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402672-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CXCR5 codifica o receptor de quimiocina Blr1 (CD185), um GPCR de sete domínios transmembrana que se liga à CXCL13 para direcionar células B e células T auxiliares foliculares (Tfh) para folículos de células B e centros germinativos. A ligação do ligante ativa a sinalização por proteínas G heterotriméricas, com vias a jusante de PI3K–AKT, MAPK e fluxos de cálcio, que coordenam quimiotaxia, dinâmica de adesão e a organização do tecido linfoide. O tráfego e o posicionamento dependentes de CXCR5 são centrais para a imunidade humoral, a maturação de afinidade e a neogênese linfoide, e a sinalização alterada de CXCR5/BLR1 é estudada em desregulação imune e neoplasias da linhagem B. Além disso, a expressão de CXCR5 em células T circulantes é amplamente usada para investigar fenótipos semelhantes aos de Tfh e seus papéis na inflamação e na autoimunidade.
Blr1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CXCR5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CXCR5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CXCR5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CXCR5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.