BimEL Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400515-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BimELO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BimEL (h) e o Plasmídeo Double Nickase BimEL (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BCL2L11. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BimEL Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400515-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BimEL Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400515-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BCL2L11 codifica a proteína pró-apoptótica Bim, do tipo BH3-only, e a isoforma Bim_EL é uma variante de splicing amplamente expressa que integra sinais de stress celular para iniciar a permeabilização da membrana externa da mitocôndria. A Bim_EL promove a apoptose intrínseca ao neutralizar membros antiapoptóticos da família BCL-2 e ao facilitar a ativação de BAX/BAK, ligando a privação de fatores de crescimento, o stress do RE e sinais do citoesqueleto à ativação das caspases. A sua atividade é regulada por controlo transcricional (por exemplo, FOXO), fosforilação pós-traducional (por exemplo, degradação dependente de MAPK/ERK) e sequestro na rede de microtúbulos, posicionando a Bim_EL na interface entre vias de sobrevivência e de morte. A desregulação do “priming” apoptótico mediado por BCL2L11 tem sido implicada na sobrevivência oncogénica, em defeitos da homeostase imunitária e em respostas alteradas ao stress celular, tornando-o um nó-chave na investigação de apoptose e destino celular.
BimEL O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BCL2L11 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BCL2L11. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BCL2L11. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BCL2L11 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.