Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
BICD2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405525
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BICD2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BICD2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BICD2 Anticorpo (E-12): sc-393631
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BICD2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405525 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
BICD2 (homólogo 2 de bicaudal D) codifica um adaptador de dineína–dinactina que acopla cargas ao transporte baseado em microtúbulos em direção à extremidade menos, sustentando o tráfego de longa distância em células polarizadas, como neurónios. Ao ligar vesículas, endossomas e organelos à dineína citoplasmática, a BICD2 contribui para a organização do complexo de Golgi, o posicionamento de endossomas, a dinâmica do envelope nuclear e processos relacionados com o ciclo celular, incluindo a orientação do fuso. O transporte dependente de BICD2 cruza-se com vias que regulam a homeostase axonal e o tráfego de membranas, nas quais a entrega precisa de cargas é necessária para a manutenção neuronal. Variações genéticas em BICD2 têm sido associadas a fenótipos neuromusculares, tornando-a um alvo relevante para estudar a biologia de neurónios motores e defeitos no transporte intracelular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BICD2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BICD2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BICD2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BICD2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BICD2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BICD2 para a investigação da sinalização de BICD2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BICD2 críticos para a função BICD2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BICD2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BICD2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo BICD2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BICD2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BICD2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR BICD2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BICD2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BICD2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.