BF-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402933
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BF-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BF-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BF-1 Anticorpo (D-12): sc-518188
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BF-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402933 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O FOXG1 humano codifica o fator de transcrição forkhead box BF-1, um regulador mestre da padronização do telencéfalo e da manutenção de progenitores neurais durante o desenvolvimento cerebral. O BF-1 atua principalmente como um represssor transcricional que se integra a redes de sinalização do desenvolvimento, incluindo programas associados a Notch, Wnt/β-catenina e TGF-β/BMP, para controlar proliferação, diferenciação e identidade regional. Por meio da modulação de genes do ciclo celular e de determinantes do destino neuronal, o FOXG1 influencia a neurogênese cortical e a maturação sináptica. A atividade ou a dosagem desregulada de FOXG1 está fortemente associada a transtornos do neurodesenvolvimento e a alterações na função de redes neuronais, tornando-o um alvo central para estudos mecanísticos em modelos de linhagem neuronal.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BF-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FOXG1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FOXG1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FOXG1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BF-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FOXG1 para a investigação da sinalização de BF-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FOXG1 críticos para a função BF-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FOXG1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BF-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo BF-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FOXG1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BF-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR BF-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FOXG1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FOXG1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.