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beta Synuclein双切口酶质粒(m) | sc-430508-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
beta Synuclein双切口酶质粒(m2) | sc-430508-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Sncb 编码 β-突触核蛋白(beta-synuclein),这是一种突触前神经元蛋白,可与突触小泡结合,并调节神经递质释放和突触可塑性。在小鼠脑内,β-突触核蛋白参与调控小泡运输、膜曲率以及蛋白质稳态(proteostasis)的相关通路,并可影响突触核蛋白家族其他成员的聚集行为。突触核蛋白稳态的改变已与神经退行性机制相关联,这些机制涉及蛋白质错误折叠、轴突运输缺陷以及突触功能障碍。因此,Sncb 常被用作一种分子切入点,用于在体内及培养神经元中解析突触维持、神经元应激反应以及突触核蛋白网络相互作用。
beta Synuclein 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Sncb 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Sncb内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Sncb的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Sncb基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。