Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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beta-catenin Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419477-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- beta-cateninO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase beta-catenin (m) e o Plasmídeo Double Nickase beta-catenin (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ctnnb1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:beta-catenin Anticorpo (E-5): sc-7963
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
beta-catenin Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419477-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
beta-catenin Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419477-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Ctnnb1 de camundongo codifica a β-catenina, uma proteína multifuncional com repetições armadillo que conecta as junções aderentes mediadas por caderinas ao citoesqueleto de actina e regula a adesão célula–célula e a arquitetura dos tecidos. Na sinalização canônica de Wnt, a β-catenina estabilizada se acumula no citoplasma e transloca para o núcleo para atuar em conjunto com fatores de transcrição TCF/LEF, coordenando programas que controlam proliferação, diferenciação e manutenção de células-tronco. A atividade da β-catenina é modulada pelo complexo de destruição (incluindo APC, AXIN e GSK3), integrando sinais de pistas do desenvolvimento e de vias responsivas ao estresse. A desregulação da sinalização da β-catenina ou de suas funções de adesão está implicada na transformação oncogênica, em defeitos do desenvolvimento e em patologias inflamatórias, tornando o Ctnnb1 um nó central para estudos mecanísticos.
beta-catenin O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ctnnb1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ctnnb1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ctnnb1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ctnnb1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.