Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
beta Actin Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-418965-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- beta ActinO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase beta Actin (m) e o Plasmídeo Double Nickase beta Actin (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Actb. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:beta Actin Anticorpo (C4): sc-47778
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
beta Actin Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-418965-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
beta Actin Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-418965-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Actb de camundongo codifica a beta-actina, uma proteína do citoesqueleto altamente conservada que se polimeriza em actina filamentosa para sustentar a forma celular, a tensão cortical e o transporte intracelular. A dinâmica da actina coordena processos fundamentais, incluindo migração celular, adesão, citocinese e mecanotransdução, por meio de vias que envolvem GTPases da família Rho, sinalização por integrinas e reguladores ligantes de actina, como o complexo Arp2/3 e a cofilina. A perturbação da remodelação da actina afeta o desenvolvimento e a homeostase dos tecidos e é amplamente relevante para fenótipos associados a doenças que envolvem motilidade celular alterada, função de barreira e integridade do citoesqueleto. Como um nó central nas redes do citoesqueleto, Actb é frequentemente usado para investigar relações estrutura–função e para normalizar ou servir de referência em perturbações celulares em sistemas de modelos murinos.
beta Actin O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Actb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Actb. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Actb. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Actb interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.