beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β₂-AR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400291-NIC

ADRB2 codifica o receptor β2-adrenérgico humano (β2-AR), um receptor acoplado à proteína G que reconhece catecolaminas e se acopla principalmente à Gs para elevar o cAMP e ativar a sinalização dependente de PKA. Por meio da regulação da atividade da adenilato ciclase, da dessensibilização do receptor via GRKs e β-arrestinas e de programas transcricionais a jusante, ADRB2 influencia o tônus do músculo liso, o metabolismo do músculo cardíaco e esquelético e a sinalização em células imunes. O β2-AR também envolve processos de internalização e tráfego do receptor que moldam a duração e o viés do sinal, integrando-se a vias de MAPK e ligadas ao cálcio de maneira dependente do contexto. A sinalização ou expressão desregulada de ADRB2 tem sido estudada em asma e hiperresponsividade das vias aéreas, fisiologia cardiovascular, fenótipos metabólicos e modulação neuroimune associada ao estresse, tornando-o um alvo amplamente utilizado em pesquisas de vias e farmacologia.

beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADRB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADRB2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADRB2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADRB2 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.