BCoR Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-409976-LAC

BCOR codifica o correpressor do BCL6 (BCoR), um coregulador transcricional nuclear que se associa ao BCL6 e a outros fatores de ligação ao DNA para modular programas de expressão gênica que controlam a diferenciação, a progressão do ciclo celular e a especificação de linhagem. O BCoR participa da repressão epigenética por meio de complexos multiproteicos ligados ao remodelamento da cromatina e à modificação de histonas, incluindo vias associadas ao Polycomb, moldando assim estados transcricionais do desenvolvimento e da hematopoese. A desregulação da função de BCOR tem sido associada a redes alteradas de repressão transcricional na biologia do câncer e em distúrbios congênitos do desenvolvimento, o que o torna um nó útil para estudar a regulação gênica dependente do contexto. Em células humanas, a atividade de BCOR é comumente investigada no contexto de programas dirigidos por fatores de transcrição, ocupação da cromatina e relações entre epigenoma e fenótipo.

As Partículas de Ativação Lentivirais BCoR (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de BCOR numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais BCoR (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição BCOR, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de BCoR. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo BCOR e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.