Bcl-9 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404408-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Bcl-9O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Bcl-9 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Bcl-9 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BCL9. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Bcl-9 Anticorpo (2071C3a): sc-81199
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Bcl-9 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404408-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Bcl-9 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404408-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BCL9 codifica a Bcl-9, um coativador de transcrição que acopla a β-catenina aos fatores de ligação ao DNA TCF/LEF para regular a expressão gênica dependente da via Wnt/β-catenina. Por meio dessa interação, a Bcl-9 influencia programas que controlam a proliferação celular, a especificação de linhagem e a homeostase tecidual, além de contribuir para a montagem de complexos transcricionais em enhancers responsivos a Wnt. A atividade desregulada de BCL9 é frequentemente associada a saídas aberrantes da sinalização Wnt observadas em diversos cânceres, nos quais o controle transcricional alterado pode favorecer a progressão tumoral e a invasividade. Assim, BCL9 é amplamente estudado como um nó que conecta a ativação a montante da via Wnt a redes transcricionais oncogênicas a jusante.
Bcl-9 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BCL9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BCL9. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BCL9. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BCL9 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.