Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BACE2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403147
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BACE2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BACE2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BACE2 Anticorpo (H-3): sc-271212
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BACE2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403147 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A BACE2 (enzima 2 de clivagem da APP no sítio beta) é uma protease aspártica transmembranar do tipo I, da família das pepsinas, que se localiza em compartimentos secretórios e endocíticos e contribui para a proteólise regulada de proteínas de membrana. Ela participa de vias ligadas ao processamento da proteína precursora de amiloide e a uma proteostase mais ampla no sistema Golgi–endossomo–lisossomo, influenciando o tráfego e a renovação de proteínas substrato. A atividade da BACE2 tem sido estudada no contexto da neurobiologia e da regulação metabólica, incluindo a função das ilhotas pancreáticas e redes de sinalização inflamatória. A expressão desregulada ou a atividade proteásica da BACE2 tem sido associada a fenótipos relevantes para doenças na neurodegeneração e em comportamentos celulares relacionados ao câncer, sustentando seu uso como alvo mecanístico em genômica funcional.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BACE2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BACE2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BACE2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BACE2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BACE2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BACE2 para a investigação da sinalização de BACE2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BACE2 críticos para a função BACE2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BACE2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BACE2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo BACE2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BACE2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BACE2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR BACE2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BACE2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BACE2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.