Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
BACE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-401500-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BACE O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BACE, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BACE Anticorpo (61-3E7): sc-33711
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BACE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-401500-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
BACE1 codifica a enzima 1 clivadora da proteína precursora do amiloide no sítio beta (BACE), uma protease aspártica que inicia o processamento amiloidogénico da APP ao gerar o N-terminal dos peptídeos Aβ. Esta atividade cruza-se com o tráfego endossomal e a proteostase lisossomal, onde compartimentos ácidos favorecem a maturação da BACE e a clivagem dos seus substratos. O processamento dependente de BACE1 influencia a função sináptica e a sinalização neuronal ao modular os níveis de fragmentos derivados da APP e de outros substratos neuronais. A expressão ou a atividade desregulada de BACE1 tem sido associada à patologia molecular relacionada com a doença de Alzheimer e é frequentemente estudada no contexto da biologia da via amiloide e dos mecanismos de neurodegeneração.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BACE (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BACE1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BACE1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BACE1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BACE.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BACE1 para a investigação da sinalização de BACE, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BACE1 críticos para a função BACE
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BACE1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BACE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo BACE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BACE1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BACE Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR BACE (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BACE1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BACE1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.