B230216G23Rik Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-435631
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- B230216G23Rik O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico B230216G23Rik, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
B230216G23Rik Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-435631 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Spx (B230216G23Rik) é um gene de camundongo que permanece caracterizado de forma incompleta, com evidências sugerindo papéis no controle transcricional e em programas de homeostase celular que influenciam a adaptação ao estresse e o estado metabólico. Como outros loci pouco anotados, sua expressão e suas potenciais interações proteicas são frequentemente investigadas no contexto da sinalização núcleo–citoplasma, do processamento de RNA e de redes de proteostase que podem moldar o comportamento do ciclo celular e o potencial de diferenciação. A variação nesses nós regulatórios é frequentemente explorada em busca de associações com fenótipos relevantes para o neurodesenvolvimento, a regulação imune e a suscetibilidade a características complexas de doença em organismos modelo. Assim, a dissecação funcional de Spx é útil para mapear redes gênicas, identificar dependências de vias e interpretar relações entre genótipo e fenótipo em sistemas derivados de camundongo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO B230216G23Rik (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Spx em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Spx, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Spx na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína B230216G23Rik.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Spx para a investigação da sinalização de B230216G23Rik, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Spx críticos para a função B230216G23Rik
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Spx para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo B230216G23Rik Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo B230216G23Rik Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Spx. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo B230216G23Rik Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR B230216G23Rik (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Spx para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Spx definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.