AVP Receptor V1a Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401691-NIC

AVPR1A codifica o receptor humano 1A da arginina vasopressina (receptor V1a de AVP), um receptor acoplado à proteína G que se acopla principalmente a Gq/11 para ativar a fosfolipase Cβ, elevando o Ca²⁺ intracelular e o diacilglicerol e, assim, promovendo a sinalização pela proteína quinase C (PKC). Esse receptor modula a contração do músculo liso vascular, a função plaquetária, a glicogenólise hepática e a sinalização neuroendócrina, integrando as respostas à vasopressina em tecidos periféricos e no sistema nervoso central. As vias dependentes de AVPR1A interagem com programas de MAPK/ERK e de genes de resposta imediata, ligando a ativação do receptor a respostas transcricionais e celulares dependentes do contexto. A desregulação da sinalização de AVPR1A ou variações genéticas tem sido investigada em fenótipos cardiovasculares e metabólicos, bem como em traços neurocomportamentais, sustentando sua relevância para estudos mecanísticos de vias responsivas à vasopressina.

AVP Receptor V1a O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AVPR1A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AVPR1A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AVPR1A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AVPR1A interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.