ATR Lentiviral Activation Particles (h): sc-400335-LAC

ATR（ataxia telangiectasia and Rad3-related）は、PI3K様セリン／スレオニンキナーゼをコードしており、複製ストレスや一本鎖DNAの主要なセンサーとして機能し、ゲノム安定性を維持するためのチェックポイントシグナル伝達を活性化します。ATRはATRIPを介してリクルートされ、TOPBP1およびETAA1によって活性化されることで、CHK1などの重要な基質をリン酸化し、S期の進行、複製フォークの安定化、ならびにDNA修復経路の選択を協調的に制御します。相同組換え因子やフォーク保護複合体とのクロストークを通じて、ATRシグナルは複製に伴う二本鎖切断を抑制し、遺伝毒性ストレス下での細胞周期停止を制御します。ATR経路の活性異常は染色体不安定性と関連しており、がん生物学、神経発達障害、DNA損傷応答の不全を伴う各種症候群の文脈で頻繁に研究されています。

ATR レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なATRの発現上昇を可能にします。

ATR レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、ATR転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性ATRの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のATRゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。