ATP5S Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406318

Visão geral

ATP5S codifica um pequeno componente acessório do complexo mitocondrial F1F0 ATP sintase (Complexo V), que catalisa a produção de ATP utilizando a força protomotriz gerada pela fosforilação oxidativa. O funcionamento adequado de ATP5S sustenta a bioenergética mitocondrial, a manutenção do potencial de membrana e a coordenação do metabolismo energético celular com processos como a apoptose e a homeostase de espécies reativas de oxigênio. Alterações na montagem da ATP sintase ou na atividade do Complexo V estão associadas à disfunção mitocondrial, uma marca observada em diversas condições, incluindo fenótipos neuromusculares e neurodegenerativos, bem como a remodelação metabólica de tumores. Assim, ATP5S é relevante para estudos de respiração mitocondrial, respostas ao estresse energético e vias de sinalização mitocondrial que influenciam decisões sobre o destino celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ATP5S (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ATP5S em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ATP5S, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ATP5S na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ATP5S.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ATP5S para a investigação da sinalização de ATP5S, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ATP5S críticos para a função ATP5S
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ATP5S para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ATP5S Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ATP5S Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ATP5S. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ATP5S Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ATP5S (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ATP5S para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ATP5S definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.