Atm Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419229-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AtmO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Atm (m) e o Plasmídeo Double Nickase Atm (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Atm. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p-Atm Anticorpo (10H11.E12): sc-47739
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Atm Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419229-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Atm Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419229-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Atm codifica uma proteína quinase de serina/treonina que atua como sensor e transdutor central da sinalização de quebras de dupla fita no DNA. Sob estresse genotóxico, a ATM é ativada e fosforila substratos-chave, incluindo H2AX, CHEK2, TP53 e BRCA1, para coordenar checkpoints do ciclo celular, a escolha da via de reparo do DNA, a remodelação da cromatina e a apoptose. Em sistemas murinos, Atm é amplamente utilizado para investigar redes de estabilidade genômica que influenciam o desenvolvimento, a diversificação do sistema imune e a integridade neuronal. A disrupção ou a função hipomórfica de ATM compromete a resposta a danos no DNA e está fortemente associada à suscetibilidade ao câncer e a fenótipos neurodegenerativos em modelos de doença.
Atm O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Atm em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Atm. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Atm. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Atm interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.