Date published: 2026-7-14

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Atg16慢病毒激活颗粒(m2): sc-429488-LAC-2

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
  • Atg16 慢病毒激活颗粒(m2)是一种协同激活介质(SAM)转录激活系统,通过细胞慢病毒转导,特异高效地上调目的基因的表达
  • Atg16慢病毒激活颗粒(m2)包含以下SAM激活元素:一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A),它融合了转录活化域VP64;一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白;一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素,潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
  • 一经转导,形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域,为高效激活基因,招募转录因子
  • 由 Atg16 慢病毒激活质粒 (m2) 和 Atg16 慢病毒激活质粒 (m22) 编码的 gRNA 靶向 Atg16l1 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
  • 转染后,基因激活效率可以用抗体:Atg16 Antibody (E-10): sc-393274,通过WB、IF或IHC分析
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    Atg16慢病毒激活颗粒(m2)

    sc-429488-LAC-2
    200 µl
    $455.00

    小鼠Atg16l1基因编码ATG16,是ATG12–ATG5–ATG16L1复合体的核心组成部分,该复合体在巨自噬过程中决定自噬体的形成,并在新生吞噬泡(phagophore)处促进LC3的脂质化;ATG16L1协调选择性自噬与基础自噬,参与细胞质质量控制、细胞器更新及抗微生物应答,并进一步影响先天免疫信号传导和上皮屏障稳态;Atg16l1的遗传或功能性扰动与炎症表型和肠道病理相关,因此常被用作构建自噬相关免疫失衡模型的靶点;在小鼠细胞或体内系统中对Atg16l1进行基因编辑,可用于在相关组织中开展自噬体生物发生、宿主–微生物互作以及应激反应通路的机制研究。

    Atg16 慢病毒激活颗粒(m2)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Atg16l1 表达。

    Atg16 慢病毒激活颗粒(m2)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Atg16l1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Atg16表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Atg16l1 基因组位点和调控架构。

    慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。