ATF-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-416821

Visão geral

ATF5 codifica o fator de transcrição ativador 5 (ATF-5), um fator de transcrição do tipo bZIP que coordena a adaptação celular ao estresse ao regular programas de expressão gênica envolvidos em sobrevivência, proteostase e diferenciação. A atividade do ATF-5 é comumente associada à sinalização da resposta integrada ao estresse e ao controle transcricional a jusante de vias dependentes de eIF2α/ATF4, com funções dependentes do contexto na função mitocondrial e na apoptose. Em células em proliferação, o ATF-5 tem sido implicado na manutenção do estado de linhagem e no suporte à remodelação do ciclo celular e do metabolismo sob condições adversas. A expressão desregulada de ATF5 foi relatada em múltiplos modelos de câncer e em outras patologias associadas ao estresse, tornando-o um nó útil para estudos mecanísticos de sinalização de estresse e de redes transcricionais.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ATF-5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ATF5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ATF5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ATF5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ATF-5.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ATF5 para a investigação da sinalização de ATF-5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ATF5 críticos para a função ATF-5
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ATF5 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ATF-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ATF-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ATF5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ATF-5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ATF-5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ATF5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ATF5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.