AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419050

概要

Agtr2は、アンジオテンシンIIに対する細胞応答を調節するレニン–アンジオテンシン系に属する、7回膜貫通型GPCRであるアンジオテンシンII受容体2型（AT2/AGTR2）をコードします。マウス組織では、AGTR2シグナルは血管緊張の制御や組織リモデリングの調節と関連づけられることが多く、一酸化窒素（NO）/cGMPシグナル、ホスファターゼ活性、ならびに増殖・アポトーシス・分化を規定するMAPK依存性プログラムなど、複数のセカンドメッセンジャー経路に影響し得ます。本受容体は、内皮、平滑筋、神経、腎臓といった文脈で研究されており、炎症や線維化の過程と交差しつつ、AT1を介した出力に拮抗する役割も担います。AGTR2が関与するアンジオテンシンシグナルの破綻は、心血管疾患、腎疾患、神経炎症性疾患の病態生物学と関連づけられており、リモデリングやストレス応答経路の機序研究において重要です。

AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAgtr2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Agtr2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Agtr2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Agtr2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2の機能に不可欠なAgtr2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Agtr2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびAT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Agtr2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 HDRプラスミド（m）および AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAgtr2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAgtr2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。