AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419050

Visão geral

Agtr2 codifica o receptor de angiotensina II tipo 2 (AT2/AGTR2), um GPCR de sete hélices transmembrana integrante do sistema renina–angiotensina, que modula as respostas celulares à angiotensina II. Em tecidos de camundongo, a sinalização de AGTR2 é comumente associada à regulação do tônus vascular e do remodelamento tecidual, podendo influenciar vias de segundos mensageiros, incluindo a sinalização por óxido nítrico/cGMP, a atividade de fosfatases e programas dependentes de MAPK que determinam proliferação, apoptose e diferenciação. O receptor é estudado em contextos endoteliais, de músculo liso, neuronais e renais, nos quais se cruza com processos inflamatórios e fibróticos e contrabalança efeitos mediados por AT1. A desregulação da sinalização da angiotensina envolvendo AGTR2 tem sido associada à biologia de doenças cardiovasculares, renais e neuroinflamatórias, tornando-o relevante para estudos mecanísticos de vias de remodelamento e de resposta ao estresse.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Agtr2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Agtr2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Agtr2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Agtr2 para a investigação da sinalização de AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Agtr2 críticos para a função AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Agtr2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Agtr2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Agtr2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Agtr2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.