ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400429

Visão geral

ASGR1 codifica o receptor 1 de asialoglicoproteínas (ASGPR1), uma lectina dependente de Ca²⁺, enriquecida em hepatócitos, que forma o complexo do receptor de asialoglicoproteínas na membrana plasmática e medeia a endocitose dependente de clatrina de glicoproteínas dessialiladas. Ao ligar-se a resíduos terminais de galactose ou de N-acetilgalactosamina, o ASGPR1 contribui para a depuração hepática de glicoproteínas circulantes e influencia vias de reciclagem do receptor e de tráfego lisossomal. Esse sistema receptor-ligante é amplamente utilizado como modelo para estudar mecanismos de captação específicos do fígado e o controle de qualidade de glicoproteínas. Alterações na expressão ou na função de ASGPR1 têm sido examinadas no contexto de estados hepáticos metabólicos e inflamatórios e são relevantes para investigações sobre a regulação de receptores de superfície de hepatócitos e a capacidade endocítica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ASGR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ASGR1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ASGR1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ASGR1 para a investigação da sinalização de ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ASGR1 críticos para a função ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ASGR1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ASGR1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ASGR1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ASGR1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.