ART1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403742-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ART1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ART1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ART1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ART1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ART1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403742-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ART1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403742-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ART1 (ecto-ADP-ribosiltransferase 1) é uma enzima ancorada à membrana por glicosilfosfatidilinositol (GPI), localizada na superfície celular, que catalisa a mono-ADP-ribosilação de proteínas-alvo utilizando NAD+ extracelular. Essa modificação pós-traducional pode influenciar a sinalização de receptores, as interações célula–célula e a dinâmica de adesão, e tem sido associada à modulação de respostas imunes e inflamatórias. A atividade de ART1 está ligada à regulação da sinalização purinérgica e de vias dependentes de NAD+ extracelular que moldam a comunicação celular em microambientes teciduais. Alterações na expressão ou na atividade de ART1 foram relatadas em contextos relevantes para a biologia do câncer, a inflamação das vias aéreas e a função de células vasculares, sustentando seu uso como um ponto mecanístico para estudar a ADP-ribosilação extracelular em células humanas.
ART1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ART1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ART1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ART1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ART1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.