ARMS Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407360-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ARMSO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ARMS (h) e o Plasmídeo Double Nickase ARMS (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KIDINS220. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ARMS Anticorpo (26): sc-136462
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ARMS Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407360-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ARMS Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407360-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KIDINS220 codifica ARMS (proteína transmembranar rica em repetições de anquirina), uma plataforma multidomínio que integra a sinalização de receptores de neurotrofinas e efrinas para coordenar a diferenciação neuronal, a orientação axonal e a plasticidade sináptica. ARMS atua a jusante dos receptores Trk para modular as vias MAPK/ERK e PI3K–AKT, ligando a ativação do receptor ao tráfego endossomal e à propagação sustentada do sinal. Além das suas funções no sistema nervoso, KIDINS220 contribui para a sinalização de células imunes e para a organização do citoesqueleto por meio de interações com proteínas adaptadoras e quinases. A disrupção genética ou a expressão alterada de KIDINS220 tem sido associada a fenótipos de neurodesenvolvimento e à desregulação de redes de sinalização, tornando-o um nó útil para estudar o “cabeamento” de vias acionadas por receptores.
ARMS O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KIDINS220 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KIDINS220. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KIDINS220. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KIDINS220 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.