Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ARL4D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406905
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ARL4D O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ARL4D, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ARL4D Anticorpo (F-2): sc-271273
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ARL4D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406905 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ARL4D (fator de ADP-ribosilação tipo GTPase 4D) é uma pequena proteína ligante de GTP do tipo ARF que alterna entre os estados ligados a GDP e a GTP para coordenar o tráfego de membranas e a remodelação do citoesqueleto. Ela tem sido implicada na regulação da dinâmica da actina, do transporte vesicular e da sinalização compartimentalizada nas membranas celulares, processos que influenciam a forma, a polaridade e a motilidade celular. A atividade de ARL4D se cruza com vias controladas por pequenas GTPases que governam o recrutamento de efetores às membranas e a organização das rotas de tráfego. Alterações na expressão ou na sinalização de ARL4D têm sido exploradas no contexto de fenótipos de proliferação e migração desregulados, relevantes para a oncologia e para outros distúrbios que envolvem a dinâmica de membranas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ARL4D (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ARL4D em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ARL4D, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ARL4D na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ARL4D.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ARL4D para a investigação da sinalização de ARL4D, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ARL4D críticos para a função ARL4D
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ARL4D para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ARL4D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ARL4D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ARL4D. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ARL4D Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ARL4D (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ARL4D para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ARL4D definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.