ARL3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416856-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ARL3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ARL3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ARL3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ARL3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ARL3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416856-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ARL3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-416856-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARL3 codifica a GTPase 3 do tipo fator semelhante ao fator de ADP-ribosilação (ADP-ribosylation factor-like), uma pequena GTPase regulatória que alterna entre os estados ligados a GDP e a GTP para coordenar o tráfego em cílios e em fotorreceptores. No cílio primário, a ARL3 atua em conjunto com a ARL13B e com a atividade GEF da ARL13B para controlar a liberação e o direcionamento de cargas lipidadas por meio de carreadores como UNC119 e PDE6D, sustentando o transporte baseado em microtúbulos e a composição da membrana ciliar. Por meio desses processos, a ARL3 contribui para a ciliogênese, a transdução de sinais e a compartimentalização de proteínas preniladas e miristoiladas. A desregulação do tráfego dependente de ARL3 está associada a fenótipos ligados aos cílios, incluindo degeneração retiniana hereditária e mecanismos mais amplos relacionados a ciliopatias, relevantes para a neurobiologia do desenvolvimento e para a biologia sensorial.
ARL3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ARL3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ARL3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ARL3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ARL3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.