ARH1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410678-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ARH1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ARH1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ARH1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADPRH. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ARH1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410678-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ARH1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-410678-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O ADPRH humano codifica a hidrolase de ADP-ribosilarginina 1 (ARH1), uma enzima citosólica que remove ADP-ribose de resíduos de arginina para reverter a mono-ADP-ribosilação. Ao restaurar as cadeias laterais proteicas nativas após a atividade das ADP-ribosiltransferases, a ARH1 contribui para a regulação da dinâmica de modificações pós-traducionais que influenciam a sinalização, a remodelação do citoesqueleto e as respostas ao estresse. Essa atividade de des-ADP-ribosilação se integra à biologia mais ampla da ADP-ribose, relevante para interações hospedeiro–patógeno e para a homeostase celular. A desregulação do turnover de ADP-ribosilação tem sido associada a alterações na sinalização inflamatória e em vias de manutenção do genoma, tornando o ADPRH um locus útil para estudos mecanísticos de controle de vias.
ARH1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADPRH em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADPRH. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADPRH. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADPRH interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.