Aquaporin 8/AQP8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419179

Visão geral

Aqp8 codifica a aquaporina 8 (AQP8), um canal de membrana que facilita o movimento rápido de água e também pode contribuir para o transporte transmembranar de pequenos solutos neutros, como o peróxido de hidrogênio, em tipos celulares selecionados. Em tecidos de camundongo, a expressão de AQP8 está associada ao manejo de fluidos por epitélios e à fisiologia secretora, e sua localização subcelular já foi relatada tanto na membrana plasmática quanto em membranas intracelulares, sustentando papéis no equilíbrio osmótico e na homeostase de organelas. Ao influenciar a permeabilidade à água e o fluxo de solutos relacionados ao estado redox, a AQP8 se conecta a processos que incluem a função de barreira epitelial, a fisiologia mitocondrial e a sinalização de estresse oxidativo. A atividade ou a expressão desregulada de AQP8 tem sido investigada no contexto de fenótipos inflamatórios e metabólicos, da fisiologia hepática e gastrointestinal e de perturbações mais amplas da homeostase redox celular relevantes para mecanismos de doença.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Aquaporin 8/AQP8 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Aqp8 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Aqp8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Aqp8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Aquaporin 8/AQP8.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Aqp8 para a investigação da sinalização de Aquaporin 8/AQP8, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Aqp8 críticos para a função Aquaporin 8/AQP8
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Aqp8 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Aquaporin 8/AQP8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Aquaporin 8/AQP8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Aqp8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Aquaporin 8/AQP8 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Aquaporin 8/AQP8 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Aqp8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Aqp8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.