Aquaporin 3/AQP3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400636-NIC

AQP3 codifica a aquaporina-3, um canal de membrana que facilita o transporte transcelular de água, glicerol e outros pequenos solutos, influenciando assim a regulação do volume celular, a homeostase osmótica e o metabolismo celular. Por meio da permeabilidade ao glicerol, a AQP3 conecta o transporte de membrana ao equilíbrio energético e a processos relacionados ao estado redox que impactam a proliferação, a migração e as respostas ao estresse em contextos epiteliais e imunológicos. A expressão e a localização da AQP3 são estudadas em tecidos de barreira, como pele e mucosas, onde a atividade alterada do canal pode modular a hidratação e a sinalização inflamatória. A desregulação da AQP3 tem sido associada ao remodelamento patológico e à biologia tumoral, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos de sinalização impulsionada por transporte e de fenótipos relevantes para doenças.

Aquaporin 3/AQP3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AQP3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AQP3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AQP3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AQP3 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.