Aquaporin 1/AQP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400340

Visão geral

AQP1 codifica a aquaporina-1, um canal de água de membrana tetramérico que permite o rápido transporte osmótico de água através das membranas plasmáticas e contribui para a homeostase de fluidos. Em contextos endoteliais e epiteliais, a AQP1 influencia a permeabilidade transcelular à água, a regulação do volume celular e a dinâmica do microambiente, que se cruza com o transporte de íons e a remodelação do citoesqueleto. Alterações na expressão e na localização da AQP1 têm sido associadas à biologia vascular, a processos relacionados a edema e à angiogênese associada a tumores, bem como a fenótipos de motilidade celular. Por ser um canal de membrana facilmente manipulável experimentalmente, a AQP1 é frequentemente estudada para relacionar o fluxo de água com a função de barreira, a migração e as respostas ao estresse.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Aquaporin 1/AQP1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene AQP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do AQP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do AQP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Aquaporin 1/AQP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de AQP1 para a investigação da sinalização de Aquaporin 1/AQP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) AQP1 críticos para a função Aquaporin 1/AQP1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos AQP1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Aquaporin 1/AQP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Aquaporin 1/AQP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus AQP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Aquaporin 1/AQP1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Aquaporin 1/AQP1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia AQP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo AQP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.