Aprataxin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417083-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AprataxinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Aprataxin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Aprataxin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para APTX. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Aprataxin Anticorpo (B-12): sc-374108
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Aprataxin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417083-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Aprataxin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-417083-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **APTX** codifica a **aprataxina**, um fator de reparo do DNA que resolve intermediários abortivos de ligação do DNA ao remover grupos adenilato das extremidades 5′ do DNA, restaurando assim extremidades passíveis de ligação durante o reparo de quebras de fita simples. A aprataxina atua em vias de manutenção do genoma ligadas à sinalização de reparo dependente de PARP, à coordenação com complexos XRCC1–ligase III do DNA e à proteção contra danos associados à replicação. A perda da atividade de APTX compromete o reparo de lesões oxidativas e induzidas por topoisomerases, promovendo o acúmulo de quebras de fita e o aumento da instabilidade genômica. A disfunção de APTX está associada a fenótipos neurodegenerativos, tornando-o um alvo relevante para o estudo das respostas a danos no DNA em contextos neuronais e de células em divisão.
Aprataxin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus APTX em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de APTX. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função APTX. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com APTX interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.