Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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APPL1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-428481-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- APPL1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase APPL1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase APPL1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Appl1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:APPL1 Anticorpo (A-1): sc-271901
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
APPL1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-428481-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
APPL1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-428481-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Appl1 codifica a APPL1, uma proteína adaptadora endossomal que se liga a Rab5 e integra a sinalização de receptores tirosina-quinase com as vias downstream PI3K–AKT e MAPK. Por meio de interações com receptores de adiponectina e componentes da sinalização de insulina, a APPL1 contribui para a regulação da captação de glicose, do metabolismo lipídico e das respostas de crescimento celular. A APPL1 também participa do tráfego endocítico e da compartimentalização de sinais, influenciando programas de sobrevivência, migração e sinalização neuronal. A sinalização ligada à APPL1, quando desregulada, tem sido associada na literatura a fenótipos metabólicos e a respostas alteradas a fatores de crescimento, sustentando sua relevância em estudos de resistência à insulina, vias relacionadas à obesidade e mecanismos de doenças guiadas por sinalização.
APPL1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Appl1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Appl1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Appl1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Appl1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.