apoO Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-427017-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- apoOO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase apoO (m) e o Plasmídeo Double Nickase apoO (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Apoo. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
apoO Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-427017-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Apoo de camundongo codifica a apoO, uma apolipoproteína enriquecida nas mitocôndrias que contribui para o manejo de lipídios e para a organização da membrana mitocondrial. A apoO tem sido associada à biologia cardiometabólica por meio de efeitos sobre a fosforilação oxidativa, a homeostase de espécies reativas de oxigênio e processos relacionados à cardiolipina que influenciam a dinâmica mitocondrial. Alterações na expressão de Apoo têm sido associadas a desregulação do metabolismo lipídico e a vias de estresse mitocondrial relevantes para fenótipos cardíacos e metabólicos. Assim, Apoo é um alvo útil para investigar a comunicação cruzada entre mitocôndrias e lipídios e programas de sinalização a jusante que modulam o equilíbrio energético celular.
apoO O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Apoo em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Apoo. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Apoo. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Apoo interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.