APOBEC3F Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406610-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- APOBEC3FO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase APOBEC3F (h) e o Plasmídeo Double Nickase APOBEC3F (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para APOBEC3F. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
APOBEC3F Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406610-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
APOBEC3F Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406610-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A APOBEC3F humana codifica uma desaminase de citidina dependente de zinco que edita DNA de fita simples ao converter citidina em uridina, introduzindo assim mutações que restringem a replicação de retrovírus e de retroelementos endógenos. Como parte da família APOBEC3, a APOBEC3F participa de vias de imunidade intrínseca que se cruzam com intermediários da replicação viral, sinalização de dano ao DNA e vigilância do genoma. Sua atividade é modulada por interações com antagonistas virais, como a Vif do HIV-1, vinculando a biologia da APOBEC3F a corridas armamentistas entre hospedeiro e patógeno e a mecanismos de escape viral. A desaminação desregulada ou direcionada incorretamente por enzimas APOBEC também está associada a processos mutacionais que podem contribuir para a instabilidade genômica, tornando a APOBEC3F um fator relevante para estudos de assinaturas mutacionais e de microambientes inflamatórios.
APOBEC3F O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus APOBEC3F em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de APOBEC3F. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função APOBEC3F. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com APOBEC3F interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.