Plásmido Doble Nickase (h) Apelin: sc-401548-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Apelin consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Apelin (h) y el plásmido de doble nickasa Apelin (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a APLN. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Apelin Anticuerpo (2A1-2D5): sc-293441
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Apelin | sc-401548-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Apelin | sc-401548-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **APLN** codifica la **apelina**, un ligando peptídico secretado del receptor acoplado a proteína G **APJ/APLNR** que regula el tono vascular, la señalización angiogénica, la contractilidad cardíaca y la homeostasis de líquidos. La unión apelina–APJ activa vías downstream que incluyen **PI3K/AKT**, **ERK/MAPK** y la señalización **eNOS/NO**, modulando la migración de células endoteliales, la respuesta del músculo liso y la comunicación metabólica cruzada en tejido adiposo y músculo esquelético. La desregulación de la señalización de la apelina se ha asociado con el remodelado cardiovascular, la enfermedad vascular pulmonar y la disfunción metabólica, lo que convierte a **APLN** en un nodo útil para estudiar la comunicación péptido–GPCR en contextos de estrés e inflamación. En biología tumoral, la apelina puede influir en programas de adaptación a la hipoxia y en la dinámica del nicho vascular, lo que respalda estudios mecanísticos de la señalización del microambiente sin implicar beneficio clínico.
Apelin El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus APLN en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de APLN. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de APLN. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con APLN alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.