AP-2α Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400935-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AP-2αO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AP-2α (h) e o Plasmídeo Double Nickase AP-2α (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TFAP2A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AP-2α Anticorpo (3B5): sc-12726
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AP-2α Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400935-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AP-2α Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400935-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O TFAP2A codifica o fator de transcrição AP-2α, uma proteína de ligação ao DNA específica de sequência que coordena programas de expressão gênica durante o desenvolvimento da crista neural, a diferenciação epidérmica e a morfogênese craniofacial. O AP-2α regula promotores e enhancers que controlam a progressão do ciclo celular, a adesão célula–célula e a especificação de linhagens epiteliais, integrando sinais de vias de desenvolvimento como WNT e redes responsivas ao ácido retinoico. A atividade desregulada de TFAP2A tem sido associada a distúrbios congênitos do desenvolvimento e a estados transcricionais alterados no câncer, nos quais mudanças em circuitos regulatórios dependentes de AP-2α podem afetar proliferação e diferenciação. Essas propriedades tornam TFAP2A um locus útil para dissecar o controle transcricional de decisões de linhagem e a biologia epitelial em modelos de células humanas.
AP-2α O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TFAP2A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TFAP2A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TFAP2A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TFAP2A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.