Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Antiquitin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417902
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Antiquitin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Antiquitin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Antiquitin Anticorpo (A-7): sc-514167
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Antiquitin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-417902 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ALDH7A1 codifica a antiquitina, uma desidrogenase de aldeídos dependente de NAD+ que participa no catabolismo da lisina ao oxidar o semialdeído do α-aminoadipato e outros aldeídos reativos relacionados. Ao desintoxicar intermediários aldeídicos, a antiquitina contribui para a homeostase redox celular e limita o acúmulo de metabólitos eletrofílicos que podem perturbar vias metabólicas e de resposta ao estresse. Variantes com perda de função estão associadas à epilepsia dependente de piridoxina, refletindo a disrupção da degradação da lisina e efeitos secundários sobre a disponibilidade de vitamina B6/PLP e o metabolismo de neurotransmissores. Assim, o ALDH7A1 é um alvo útil para estudar o acoplamento metabólico mitocôndria–citossol, a biologia do estresse por aldeídos e erros inatos do metabolismo em modelos de células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Antiquitin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ALDH7A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ALDH7A1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ALDH7A1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Antiquitin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ALDH7A1 para a investigação da sinalização de Antiquitin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ALDH7A1 críticos para a função Antiquitin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ALDH7A1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Antiquitin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Antiquitin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ALDH7A1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Antiquitin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Antiquitin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ALDH7A1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ALDH7A1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.