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ANP32B双切口酶质粒(h) | sc-417840-NIC | 20 µg | $410.00 |
ANP32B(acidic leucine-rich nuclear phosphoprotein 32 family member B,酸性富亮氨酸核磷蛋白32家族成员B)是一种保守的核磷蛋白,参与与染色质相关的过程、转录调控以及细胞周期控制。作为ANP32家族的一员,ANP32B可调节蛋白磷酸酶活性,参与与凋亡相关的信号传导,并在核内行使与RNA相关的功能,从而影响细胞应激反应。ANP32B活性受扰动与增殖能力改变及基因表达程序失调有关,这些现象在多种癌症相关背景中均有观察到。因此,ANP32B是研究人类细胞模型中核信号网络、染色质动态以及细胞命运决定因素的一个有价值的靶点。
ANP32B 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ANP32B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ANP32B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ANP32B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ANP32B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。