Annexin V Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400836-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Annexin VO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Annexin V (h) e o Plasmídeo Double Nickase Annexin V (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ANXA5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Annexin V Anticorpo (H-3): sc-74438
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Annexin V Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400836-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Annexin V Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400836-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANXA5 codifica a anexina V, uma proteína de ligação a fosfolipídios dependente de Ca²⁺ que se associa preferencialmente à fosfatidilserina na face interna da membrana plasmática e se redistribui durante o remodelamento de membranas. A anexina V participa do tráfego de membranas regulado por cálcio, da dinâmica de vesículas e da organização do citoesqueleto, sendo amplamente utilizada como leitura molecular da externalização de fosfatidilserina durante a apoptose. Por atuar na interface membrana–citoesqueleto, a anexina V está ligada a vias que governam a sobrevivência celular, a inflamação e superfícies relacionadas à coagulação. A expressão desregulada de ANXA5 e fenótipos de exposição de fosfatidilserina têm sido estudados na biologia do câncer, em contextos autoimunes e em mecanismos associados ao sistema vascular, reforçando sua relevância como um nó funcional na sinalização de estresse e morte celular.
Annexin V O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ANXA5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ANXA5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ANXA5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ANXA5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.