Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Annexin A10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406977
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Annexin A10 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Annexin A10, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Annexin A10 Anticuerpo (E-11): sc-398736
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Annexin A10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406977 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
ANXA10 codifica la anexina A10, un miembro de la familia de las anexinas, proteínas que se unen al Ca²⁺ y a fosfolípidos e intervienen en procesos asociados a la membrana. Aunque la anexina A10 carece de algunas características canónicas de unión a Ca²⁺ presentes en otras anexinas, se la ha relacionado con la regulación de la diferenciación de células epiteliales, el tráfico de membranas y programas de polaridad celular que influyen en la homeostasis tisular. La expresión de ANXA10 está enriquecida en contextos epiteliales específicos y se ha asociado con estados transcripcionales característicos de linajes mucosos y glandulares. Se ha descrito una expresión desregulada de ANXA10 en múltiples tipos de cáncer y con frecuencia se estudia como marcador de diferenciación alterada y de la biología de subtipos tumorales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Annexin A10 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ANXA10 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ANXA10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ANXA10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Annexin A10.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ANXA10 para la investigación de la señalización de Annexin A10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ANXA10 críticos para la función de Annexin A10
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ANXA10 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Annexin A10 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Annexin A10 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ANXA10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Annexin A10 (h) y el plásmido HDR Annexin A10 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ANXA10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ANXA10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.