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ANKFY1慢病毒激活颗粒(h) | sc-406658-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
ANKFY1慢病毒激活颗粒(h2) | sc-406658-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
人源 ANKFY1(ankyrin repeat and FYVE domain containing 1,含 ankyrin 重复序列与 FYVE 结构域蛋白 1)编码一种与膜相关的衔接蛋白,参与内体运输以及依赖磷脂酰肌醇的膜动态过程。ANKFY1 通过其 FYVE 结构域与富含 PI3P 的内体区室相联系,相关研究关注其在货物分选、受体回收以及内溶酶体系统中囊泡成熟调控方面的作用。这些过程与信号稳态和细胞应激反应相互交叉,使 ANKFY1 成为研究“运输依赖性通路调控”机制的一个重要靶点。内体运输网络失调与复杂疾病生物学有关,包括致癌信号通路的重编程以及神经退行性表型,因此也推动了对 ANKFY1 通路扰动模型的研究兴趣。
ANKFY1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 ANKFY1 表达。
ANKFY1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在ANKFY1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性ANKFY1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 ANKFY1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。