Angptl4 Plasmide Double Nickase (h): sc-401369-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Angptl4 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Angptl4 Double Nickase Plasmid (h) e il Angptl4 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ANGPTL4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Angptl4 Antibody (A-2): sc-373761
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Angptl4 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401369-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Angptl4 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401369-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANGPTL4 (Angiopoietin-like 4) codifica una glicoproteina secreta che modula il metabolismo lipidico ed energetico inibendo la lipoproteina lipasi e alterando la clearance delle lipoproteine ricche di trigliceridi. Angptl4 è regolata a livello trascrizionale dalla segnalazione di PPAR e collega la disponibilità di nutrienti all’adattamento metabolico, influenzando la lipolisi nel tessuto adiposo, la gestione dei lipidi a livello epatico e la sensibilità insulinica sistemica. Oltre al metabolismo, Angptl4 partecipa al rimodellamento dell’endotelio e della matrice extracellulare, con effetti sulla permeabilità vascolare, sull’infiammazione e sulle interazioni cellula–matrice. Un’espressione deregolata di ANGPTL4 è stata associata a fenotipi cardiometabolici, stati infiammatori e programmi del microambiente tumorale, inclusi pathway legati all’ipossia e alla metastasi, rendendola un bersaglio utile per studi meccanicistici.
Angptl4 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ANGPTL4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ANGPTL4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ANGPTL4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ANGPTL4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.