Angptl2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-424003-LAC

A angiopoietina-like 2 de camundongo (Angptl2) é uma glicoproteína secretada que modula a biologia vascular e estromal ao influenciar o comportamento de células endoteliais, a remodelação da matriz extracelular e a inflamação tecidual. Ela é comumente associada a redes de sinalização pró-inflamatórias, incluindo programas transcricionais ligados ao NF-κB, e pode moldar o recrutamento de leucócitos e a ativação de macrófagos em tecidos lesionados ou sob estresse metabólico. A expressão de Angptl2 tem sido associada à disfunção do tecido adiposo, a estados inflamatórios relacionados à resistência à insulina, à remodelação vascular e a alterações no microambiente associado a tumores, tornando-a relevante para estudos de inflamação crônica e de processos semelhantes à fibrose. Como fator circulante ou parácrino local, a Angptl2 é frequentemente investigada por seus efeitos na comunicação célula–célula e na sinalização de citocinas/quimiocinas em modelos de lesão específicos de órgãos.

As Partículas de Ativação Lentivirais Angptl2 (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Angptl2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Angptl2 (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Angptl2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Angptl2. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Angptl2 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.