Angiotensinogen Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419047

Visão geral

O gene Agt de camundongo codifica o angiotensinogênio, uma glicoproteína secretada derivada do fígado que atua como precursor dos peptídeos de angiotensina no sistema renina–angiotensina (SRA). O processamento proteolítico pela renina e pela enzima conversora de angiotensina gera angiotensinas bioativas que regulam o tônus vascular, a homeostase de sódio e de fluidos e a sinalização endócrina no rim, na adrenal, no coração e no cérebro. A atividade do SRA mediada pelo angiotensinogênio se cruza com vias inflamatórias e de estresse oxidativo e influencia o remodelamento tecidual e a fibrose por meio da sinalização da angiotensina II. A expressão ou o processamento desregulados de Agt são amplamente utilizados como ponto de partida mecanístico para estudar a fisiopatologia cardiovascular e renal, respostas ao estresse metabólico e a comunicação entre órgãos em modelos murinos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Angiotensinogen (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Agt em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Agt, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Agt na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Angiotensinogen.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Agt para a investigação da sinalização de Angiotensinogen, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Agt críticos para a função Angiotensinogen
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Agt para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Angiotensinogen Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Angiotensinogen Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Agt. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Angiotensinogen Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Angiotensinogen (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Agt para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Agt definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.