Angiopoietin 2/Ang-2/ANGPT2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400477-NIC

ANGPT2 codifica a angiopoietina-2 (Ang-2), um ligante secretado do receptor tirosina-quinase endotelial TEK/TIE2, que modula o remodelamento vascular, a ativação endotelial e a permeabilidade. Em contraste com a estabilização mediada por ANGPT1, a Ang-2 frequentemente atua como um antagonista dependente do contexto da sinalização de TIE2, sensibilizando o endotélio a citocinas inflamatórias e a sinais angiogênicos conduzidos por VEGF. A ANGPT2 integra-se a programas ligados a PI3K–AKT, MAPK e NF-κB para influenciar a brotação, a dinâmica das junções e o tráfego de leucócitos. A expressão desregulada de ANGPT2 é frequentemente associada à angiogênese patológica e à inflamação vascular observadas em tumores, retinopatias e distúrbios cardiometabólicos e inflamatórios, sustentando seu uso como um nó mecanístico em pesquisas de biologia vascular.

Angiopoietin 2/Ang-2/ANGPT2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ANGPT2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ANGPT2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ANGPT2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ANGPT2 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.