ANG III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419105
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ANG III O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ANG III, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ANG III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419105 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Ang3 de camundongo codifica a angiopoietina-3 (ANG III), um ligante secretado do receptor tirosina-quinase TEK/TIE2 que regula o desenvolvimento vascular e a homeostase endotelial. A ANG III participa da sinalização angiopoietina–TIE, que coordena a sobrevivência das células endoteliais, a maturação dos vasos, a permeabilidade e o remodelamento, em conjunto com sinais dependentes de VEGF. A atividade alterada da via das angiopoietinas está associada à angiogênese desregulada e a respostas vasculares inflamatórias relevantes para estudos de vascularização tumoral, lesão isquêmica e mecanismos de doenças retinovasculares. Como modulador dependente do contexto da sinalização endotelial, o Ang3 constitui um ponto acessível para dissecar o controle microambiental da estabilidade vascular e da perfusão tecidual em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ANG III (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ang3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ang3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ang3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ANG III.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ang3 para a investigação da sinalização de ANG III, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ang3 críticos para a função ANG III
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ang3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ANG III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ANG III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ang3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ANG III Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ANG III (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ang3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ang3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.