ANG I CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401766

概要

アンジオジェニン（ANG。ANG Iとも呼ばれる）は、分泌性のRNase Aスーパーファミリーに属するタンパク質で、血管新生シグナル伝達とストレス適応的なRNA代謝を制御します。ANGは核内へ移行してrRNA転写を促進し、リボソーム生合成と増殖能を支えるほか、tRNAを切断して翻訳を調節するストレス誘導性断片を生成します。これらの作用を通じて、ANGは細胞外からの刺激とRNAプロセシングプログラムを統合し、内皮細胞の挙動、炎症、ストレス下での細胞生存に影響を与えます。ANGの発現や活性の破綻は、病的な血管リモデリングや神経変性様の表現型と関連していることが報告されており、血管新生およびRNAストレス経路の機序研究における有用な解析ノードとなっています。

ANG I CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるANG遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ANG内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ANGのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ANG Iタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ANG Iシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ANG欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ANG Iの機能に不可欠なANGエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ANGゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ANG I CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびANG I CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ANG遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ANG I HDRプラスミド（h）および ANG I HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはANGホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のANG標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。