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AMPKβ1慢病毒激活颗粒(h) | sc-402952-LAC | 200 µl | $455.00 |
PRKAB1 编码 AMP 活化蛋白激酶(AMPK)的 β1 调节亚基。AMPK 是细胞内关键的能量传感器,可整合细胞 AMP/ATP 状态以协调代谢稳态。AMPKβ1 参与异源三聚体复合物的组装、亚细胞定位以及糖原结合,从而影响下游对葡萄糖摄取、脂肪酸氧化、自噬的调控,并通过 mTORC1 等通路抑制合成代谢信号。通过这些功能,AMPKβ1 有助于将营养供应与应激反应连接到维持能量平衡的转录与翻译后调控程序上。AMPK 信号及 PRKAB1 相关复合物的失调,与癌症中的代谢重编程、胰岛素抵抗以及其他与线粒体功能和营养感知改变相关的疾病研究密切相关。
AMPKβ1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PRKAB1 表达。
AMPKβ1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在PRKAB1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性AMPKβ1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 PRKAB1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。