AMBRA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404108-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AMBRA1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AMBRA1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase AMBRA1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AMBRA1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AMBRA1 Anticorpo (G-6): sc-398204
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AMBRA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404108-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AMBRA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404108-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AMBRA1 (regulador 1 de autofagia e beclina 1) codifica uma proteína scaffolding que coordena o início da autofagia ao modular o complexo BECLIN1/PIK3C3 e integrar sinais de vias de nutrientes e de estresse. A AMBRA1 também se conecta à proteostase dependente de ubiquitina e ao controle do ciclo celular, contribuindo para a homeostase celular por meio da regulação do controle de qualidade mitocondrial e de sinalização relacionada à apoptose. A desregulação de redes de autofagia ligadas à AMBRA1 tem sido associada a alterações no desenvolvimento neuronal e a processos relevantes para tumores, tornando-a um nó útil para estudar adaptação ao estresse e desequilíbrio da proteostase em células humanas. Como reguladora de autofagia com ampla conectividade entre vias, a AMBRA1 é frequentemente investigada em modelos de neurobiologia, metabolismo e sinalização em células cancerosas.
AMBRA1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AMBRA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AMBRA1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AMBRA1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AMBRA1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.