AMBP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403136-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AMBPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AMBP (h) e o Plasmídeo Double Nickase AMBP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AMBP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AMBP Anticorpo (532): sc-81948
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AMBP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403136-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AMBP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403136-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AMBP codifica o precursor de alfa-1-microglobulina/bikunin, uma glicoproteína secretada que é processada proteoliticamente em alfa-1-microglobulina e bikunin, os quais circulam no plasma e estão presentes em fluidos extracelulares. A alfa-1-microglobulina atua como um sequestrador que se liga ao heme e a radicais, estando implicada na homeostase redox e na proteção contra o estresse oxidativo, enquanto o bikunin é um inibidor de proteases de serina do tipo Kunitz que contribui para a regulação de proteases extracelulares e para a modulação inflamatória. Por meio de complexos de inter-alfa-inibidor contendo bikunin, o AMBP está associado à estabilização da matriz extracelular, a redes de proteases relacionadas à coagulação e a respostas a lesão tecidual. Alterações na expressão e no processamento de AMBP têm sido associadas a estados inflamatórios, a marcadores de disfunção renal e hepática e a processos de remodelamento relevantes em diversos contextos de modelos de doença.
AMBP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AMBP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AMBP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AMBP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AMBP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.